Aquatic

DNA Extraction from Sterivex (0.22µm) or Polycarbonate Filter (3µm) (En Español)

Creado por el Laboratorio Castro.


1. Extracción de ADN

1.1 Materiales

  • Placa petri
  • Sonicador
  • Bisturí
  • Micropipeta (p1000, p200, p20)
  • Guantes
  • Buffer de lisis
  • Lisozima (100 mg/µl)
  • Tubo de molienda
  • Beads
  • Proteinasa K (200 mg/µl)
  • SDS 10%
  • Solución fenol-cloroformo-alcohol isoamílico
  • Isopropanol
  • Etanol 70%
  • Pinzas
  • Puntas micropipeta (p1000, p200, p20)
  • Tijeras de podar
  • Tubos (1.5 mL)
  • Tubos (2 mL)

1.2 Procedimiento

Retirar con pinzas estériles el filtro de policarbonato (3 µm) del tubo Falcon y depositarlo en una placa de Petri. Utilizando un bisturí y una punta de micropipeta P1000, cortar el filtro en pequeños trozos y transferirlos a un tubo de 2 mL con beads de borosilicato (Merck, Z273619-1EA). Por lo general, el filtro mantiene gotas residuales de filtración; transfiera todo el líquido al tubo con beads.

Sampling and Filtration of Water from Mesocosm Experiments (En Español)

Creado por el Laboratorio Castro.


1. Recolección de muestras de agua

1.1 Materiales

  • Generador Honda EU10i
  • Alargador
  • Electrobomba con rodete periférico
  • Malla de 50 µm (Sefar)
  • Manguera para bomba eléctrica (FLEXHOSE PVC FIBER REINFORCED 70 PS)
  • Cuerda (~60 m)
  • Bidones de 35 L
  • Sensor Hobo Onset Temp/Light
  • Amarracables (pequeños y medianos)
  • Guantes
  • Botellas J 125 mL
  • Multiparámetro (HANNA HI9829)
  • Caja con diversas herramientas
  • Jarro de 1 L
  • Paños de limpieza
  • Cinta americana (DuckTape)
  • Jeringa 50 mL

1.2 Procedimiento

El día anterior al muestreo, lavar todo el material (bidones y jarro) con agua corriente (1 vez), hipoclorito de sodio al 1% (1 vez) y agua miliQ (3 veces).